57
αναποδογυρίζονταν κάθε μέρα ώστε οι προνύμφες να αναγκάζονται να κινούνται μέσα στο χώμα
(Keller
et al
2000). Οι νεκρές ή μουμιοποιημένες προνύμφες απομακρύνθηκαν και εν συνεχεία
αποστειρώθηκαν εξωτερικά σε 1% υποχλωριώδες νάτριο για μερικά δευτερόλεπτα.
Εν συνέχεια οι
νεκρές ή μουμιοποιημένες προνύμφες τοποθετήθηκαν σε πλαστικά τρυβλία τύπου Petri που είχαν
υψηλή υγρασία (moist chamber). Αυτό επιτεύχθηκε με εναπόθεση ορισμένων σταγόνων νερού πάνω
σε διηθητικό χαρτί, κυκλικού σχήματος μέσα στα τρυβλία. Μετά από την πάροδο 48 ωρών σε
θερμοκρασία δωματίου εμφανίζονται τα συμπτώματα (επανθήσεις) των εντομοπαθογόνων μυκήτων
στις προσβεβλημένες προνύμφες. Τέλος καλλιεργονται τα κονίδια των μυκήτων, που συλλέγονται από
τις προνύμφες, σε υπόστρωμα S.D.A ή P.D.A με τη χρήση εστίας νηματικής ροής.
Η μέθοδος της χρήσης ως δολώματος του εντόμου
Galleria mellonella
Διαδικασία για την απομόνωση των εντομοπαθογόνων μυκήτων από
τις νεκρές προνύμφες του
Galleria mellonella
Επάνθηση μυκηλίου
M. anisopliae
(με πράσινο ή λευκό-πράσινο χρώμα) σε προνύμφες
G. mellonella
και
μουμιοποιημένες προνύμφες
G. mellonella
λόγω της δράσης του
B. bassiana
(ρόδινο χρώμα)
Καλλιέργειες
Beauveria bassiana, Paecilomyces fumosoroseus
και
Metarhizium anisopliae
σε
υπόστρωμα
Sabouraud Dextrose Agar
Με τη μέθοδο αυτή απομονώθηκαν οι εντομοπαθογόνοι μύκητες
Beauveria bassiana,
Paecilomyces fumosoroseus
και
Metarhizium anisopliae
οι οποίοι στη συνέχεια καλλιεργήθηκαν σε
υπόστρωμα Sabouraud Dextrose Agar (SDA).
