Page 194 - 2010-2011

193
αλλοιώσεις που προκλήθηκαν στο DNA των κυττάρων HepG2 ύστερα από σύντομη επώαση με χαμηλή
συγκέντρωση υπεροξειδίου του υδρογόνου. Το αποτέλεσμα αυτό υποδεικνύει ότι η ελευροπαΐνη μπορεί να
επιδείξει προστατευτική δράση σε αλλοιώσεις του DNA που προκλήθηκαν από οξειδωτικό στρες.
Περαιτέρω πειράματα διενεργούνται ώστε να διερευνηθεί ο πιθανός προστατευτικός ρόλος της
ελευροπαΐνης και στην υπεροξείδωση των λιπιδίων της κυτταρικής μεμβράνης.
ΤΜΗΜΑ Ελέγχου Γεωργικών Φαρμάκων και
Φυτοφαρμακευτικής
ΕΡΓΑΣΤΗΡΙΟ Τοξικολογικού Ελέγχου Γεωργικών
Φαρμάκων
ΥΠΕΥΘΥΝΟΣ ΕΡΓΟΥ Δρ Κ. Κυριακοπούλου
ΕΜΠΛΕΚΟΜΕΝΟ ΠΡΟΣΩΠΙΚΟ Δρ Ε. Κατσάνου, Δρ Χ. Εμμανουήλ, Δρ Κ.
Μαχαίρα
ΔΙΑΡΚΕΙΑ ΕΡΓΟΥ (ΕΝΑΡΞΗ - ΛΗΞΗ) 2 έτη
Π ΗΓΗ ΧΡΗΜΑΤΟΔΟΤΗΣΗΣ ΜΦΙ
2.3.8 Επαγωγή της μεταγραφής των ηπατικών ενζύμων CYP1A1 και CYP1A2 μετά
από χορήγηση καφεΐνης και μαστίχας σε αρσενικούς επίμυες της φυλής
Wistar.
Σε συνέχεια της μελέτης για την επαγωγή των ηπατικών ενζύμων CYP1A1 και CYP1A2 μετά
από χορήγηση μαστίχας και καφεΐνης σε αρσενικούς επίμυες που ξεκίνησε αρχικά το 2009,
πραγματοποιήθηκαν κάποια επιπλέον επαναληπτικά και επιβεβαιωτικά πειράματα. Η δόση της
μαστίχας επιλέχθηκε διότι αποτελεί τη μέγιστη φαρμακευτική δόση που συνίσταται να λαμβάνεται από
τον άνθρωπο. Η χαμηλή δόση της καφεΐνης που επιλέχθηκε αντιστοιχεί στη μέση ημερήσια λήψη
καφεΐνης που λαμβάνεται από έναν ενήλικα ενώ η υψηλή αντιστοιχεί σε υπερβολική ημερήσια δόση
και χρησιμοποιήθηκε ως θετικός μάρτυρας για την επαγωγή των CYP1A1 και CYP1A2.
Η επίδραση της χορηγούμενης από στόματος μαστίχας και καφεΐνης στα επίπεδα έκφρασης
του CYP1A1 και CYP1A2 σε ήπαρ επίμυος εκτιμήθηκε με τη μέθοδο του ποσοτικού real-time PCR. Τα
αποτελέσματα της ποσοτικής κανονικοποίησης φαίνονται στον παρακάτω πίνακα.
Ουσία CYP1A1 p value CYP1A2 p value
CAF 30 mg/kg b.w. 2.286 ± 0.897 0.650 0.878 ± 0.111 0.946
CAF 100 mg/kg b.w. 21.174 ± 4.112 0.001 2.067 ± 0.104 0.000
CMG 1428 mg/kg b.w. 1.289 ±0.352 0.985 0.217 ± 0.054 0.000
CMG 2000 mg/kg b.w. 3.538 ±1.059 0.184 0.556 ± 0.097 0.051
Η επαγωγή ή η μείωση της έκφρασης του mRNA (μετά από κανονικοποίηση με τη β-ακτίνη)
παρουσιάζεται σε σχέση με την ομάδα ελέγχου των ζώων. Κάθε τιμή αντιπροσωπεύει τη μέση τιμή ±
ΣΣΜΤ (Σταθερό Σφάλμα Μέσης Τιμής) από τουλάχιστον 3 ανεξάρτητα πειράματα. Η στατιστική
ανάλυση πραγματοποιήθηκε με one-way ANOVA ακολουθούμενη από το Games-Howell post-hoc
test, και οι τιμές με p<0.05 κρίθηκαν ως στατιστικά σημαντικές.
Τέλος, η επίδραση της χορηγούμενης από στόματος μαστίχας και καφεΐνης στην δραστικότητα
του CYP1A1 σε ήπαρ επίμυος εκτιμήθηκε μέσω της διαφοράς του ρυθμού αύξησης δημιουργίας
resorufin από ethoxyresorufin στην κάθε ελεγχόμενη ομάδα, όπως φαίνεται στον παρακάτω πίνακα
Ουσία CYP1A1 (pmol resorufin/min/mg protein)
Ομάδα ελέγχου 57.15 ± 12.5
CAF 100 mg/kg b.w. 176.64 ± 14.02**
CMG 2000 mg/kg b.w. 60.20 ± 6.73