67
Ανάπτυξη του εντομοπαθογόνου μύκητα
Metarhizium anisopliae
επί προνυμφης του
Paysandisia archon.
Τ
ΜΗΜΑ
Εντομολογίας και Γεωργικής Ζωολογίας
Ε
ΠΙΣΤΗΜΟΝΙΚΟΣ
Υ
ΠΕΥΘΥΝΟΣ
Ε
ΡΓΟΥ
Δρ Β. Βασιλείου (Ινστιτούτο Γεωργικών Ερευνών Κύπρου)
Ε
ΠΙΣΤΗΜΟΝΙΚΟΣ
Υ
ΠΕΥΘΥΝΟΣ ΓΙΑ ΤΟ
ΜΦΙ
Δρ Δ.Χ. Κοντοδήμας
Ε
ΡΕΥΝΗΤΕΣ
Δρ Δ.Χ. Κοντοδήμας, Δρ Π.Γ. Μυλωνάς
Δ
ΙΑΡΚΕΙΑ
Ε
ΡΓΟΥ
14.02.2012 - 14.08.2014
Σ
ΥΝΟΛΙΚΟΣ
Π
ΡΟΫΠΟΛΟΓΙΣΜΟΣ ΕΡΓΟΥ
3.220 €
Π
ΡΟΫΠΟΛΟΓΙΣΜΟΣ ΓΙΑ ΤΟ
2014
3.220 €
Κ
ΑΛΥΨΗ
Δ
ΑΠΑΝΗΣ
100% από τη δράση ΑΕΙΦΟΡΙΑ/ΦΥΣΗ/0311(ΒΙΕ)06 ΙΠΕ
Κύπρου
2.3.4.3 Νέοι ενζυμικοί στόχοι για την ανάπτυξη καινοτόμων εντομοκτόνων
Συλλέχθηκαν δείγματα χώματος από διάφορες περιοχές της Ελλάδος. Οι δειγματοληψίες
χώματος (300 gr/δείγμα) έγιναν από βάθος 3-10cm. Τα δείγματα τοποθετήθηκαν σε πλαστικές
σακούλες και στην συνέχεια μεταφέρθηκαν στο εργαστήριο για επεξεργασία. Τα σημεία της
δειγματοληψίας καταγράφηκαν με χρήση συσκευής GPS Garmin Ehtrex. Από τα δείγματα αυτά
απομονώθηκαν εντομοπαθογόνοι μύκητες με την μέθοδο της χρήσης ως δολώματος του εντόμου
Galleria mellonella
(
Galleria
Bait Method) (Zimmermann 1986) ως εξής: Το χώμα τοποθετήθηκε σε
μικρά πλαστικά δοχεία και σε τρυβλία τύπου Petri. Στην συνέχεια προνύμφες
Galleria mellonella
εμβαπτίστηκαν σε ζεστό νερό θερμοκρασίας 40-45
ο
C για μερικά δευτερόλεπτα και έπειτα
τοποθετηθήκαν 10 - 15 από αυτές στα δοχεία και τα τρυβλία που προαναφέραμε. Τα δοχεία και τα
τρυβλία τοποθετήθηκαν σε θερμοκρασία δωματίου (25±1
o
C) για 14 ήμερες και τις πρώτες 4 ήμερες
αναποδογυρίζονταν κάθε μέρα ώστε οι προνύμφες να αναγκάζονται να κινούνται μέσα στο χώμα
(Keller et al 2000). Οι νεκρές ή μουμιοποιημένες προνύμφες απομακρύνθηκαν και εν συνεχεία
αποστειρώθηκαν εξωτερικά σε 1% υποχλωριώδες νάτριο για μερικά δευτερόλεπτα.
Εν συνέχεια οι
νεκρές ή μουμιοποιημένες προνύμφες τοποθετήθηκαν σε πλαστικά τρυβλία τύπου Petri που είχαν
υψηλή υγρασία (moist chamber). Αυτό επιτεύχθηκε με εναπόθεση ορισμένων σταγόνων νερού πάνω
σε διηθητικό χαρτί, κυκλικού σχήματος μέσα στα τρυβλία. Μετά από την πάροδο 48 ωρών σε
θερμοκρασία δωματίου εμφανίζονται τα συμπτώματα (επανθήσεις) των εντομοπαθογόνων μυκήτων
στις προσβεβλημένες προνύμφες. Τέλος καλλιεργονται τα κονίδια των μυκήτων, που συλλέγονται από
τις προνύμφες, σε υπόστρωμα S.D.A ή P.D.A με τη χρήση εστίας νηματικής ροής.
Με τη μέθοδο αυτή απομονώθηκαν οι εντομοπαθογόνοι μύκητες
Beauveria bassiana,
Paecilomyces fumosoroseus
και
Metarhizium anisopliae
οι οποίοι στη συνέχεια καλλιεργήθηκαν σε
υπόστρωμα Sabouraud Dextrose Agar (SDA).
