127
ενώσεων και εκχυλισμάτων της Μαστίχας Χίου, χρησιμοποιώντας την κυτταρική σειρά ηπατοκαρκινώματος
ανθρώπου HepG2. Οι ενώσεις που μελετώνται είναι δύο καθαρές ισομερείς ουσίες (μαστιχαδιενονικό οξύ
και ισομαστιχαδιενονικό οξύ), το ολικό εκχύλισμα μαστίχας, από το οποίο έχει αφαιρεθεί το πολυμερές
κλάσμα, το ολικό εκχύλισμα μαστίχας με το πολυμερές κλάσμα, καθώς και το όξινο και ουδέτερο κλάσμα
της μαστίχας. Οι έλεγχοι που πραγματοποιούνται είναι οι εξής:
-
μελέτη κυτταρικού πολλαπλασιασμού και κυτταροτοξικότητας με τη χρήση χρωμογόνου MTT,
-
μελέτη της απόπτωσης με τη μέθοδο Ιn Cell Western - apoptosis assay,
-
μελέτη επαγωγής οξειδωτικού stress και γονοτοξικότητας με τη μέθοδο COMET assay,
-
μελέτη της τυχόν προστατευτικής δράσης έναντι του οξειδωτικού stress ή/και της γονοτοξικότητας
με τη μέθοδο COMET assay.
-
μελέτη αντιοξειδωτικών αντιστάσεων με αλυσιδωτή αντίδραση πολυμεράσης με χρήση
αντίστροφης μεταγραφάσης σε πραγματικό χρόνο (RT-qPCR)
-
μελέτη ενζυμικών δεικτών με τη μέθοδο RT-qPCR.
Μέχρι στιγμής, έχει γίνει μελέτη κυτταρικού πολλαπλασιασμού με χρήση ΜΤΤ σε συγκεντρώσεις
από 0.5 pg/mL έως 200 μg/mL για τα εκχυλίσματα και 10-12 Μ έως 10-5 Μ για τις καθαρές ουσίες. Τα
αποτελέσματα έδειξαν σημαντική κυτταροτοξική δράση του ολικού εκχυλίσματος, παρουσία ή απουσία
του πολυμερούς, σε συγκέντρωση μεγαλύτερη των 25μg/ml. Παρόμοια αποτελέσματα έδειξε και το
όξινο και ουδέτερο κλάσμα της μαστίχας ενώ δεν παρατηρήθηκε σημαντική κυτταροτοξικότητα υπό τη
δράση των καθαρών ουσιών. Ενδεικτικά παρουσιάζονται τα αποτελέσματα του ολικού εκχυλίσματος
μαστίχας στο Γράφημα 4.4.4-1 καθώς και των καθαρών ουσιών στα Γραφήματα 4.4.4-2 και 4.4.4-3.
Γράφημα 4.4.4-1.
Αποτελέσματα πειραμάτων κυτταροτοξικότητας με τη μέθοδο ΜΤΤ σε κύτταρα HepG2 μετά
από 24-ωρη επώαση με το ολικό εκχύλισμα μαστίχας απουσία του πολυμερούς. Οι τιμές είναι ο μέσος όρος ±
SEM από 3 ανεξάρτητα πειράματα. ***, p < 0.001 μεταξύ του δείγματος ελέγχου και του υπό εξέταση
εκχυλίσματος (ANOVA).
