78
εκχυλισμάτων από το φυτό
Οpuntia ficus
ευρέως γνωστό ως φραγκόσυκο. Το εν λόγω φυτό έχει δειχθεί
από διεθνής μελέτες ότι εμφανίζει ευεργετικές επιδράσεις σε διάφορα συστήματα (anti-oxidative activity,
anti-ulcerogenic activity, protective effects against hepatotoxic compounds, against gastric lesion). Πιο
συγκεκριμένα, μελετήθηκαν τα υδατικά εκχυλίσματα που έχουν προέλθει από τα εξής μέρη του φυτού:
Opuntia ficus idica flower
(OF1)
, Opuntia ficus idica cladode
(OF2)
, Opuntia ficus idica fruit peel
(OF3)
,
Opuntia ficus idica seed
(OF4)
, Opuntia ficus idica fruit flesh
(OF5)
.
Οι μέθοδοι που εφαρμόστηκαν ήταν οι εξής:
-
μελέτη κυτταρικού πολλαπλασιασμού και κυτταροτοξικότητας με τη χρήση χρωμογόνου MTT,
-
μελέτη επαγωγής οξειδωτικού stress και γονοτοξικότητας με τη μέθοδο COMET assay,
-
μελέτη πιθανής προστατευτικής δράσης έναντι του οξειδωτικού stress ή/και της γονοτοξικότητας
με τη μέθοδο COMET assay.
-
μελέτη της κυτταροτοξικότητας, γονοτοξικότητας και πιθανής προστατευτικής δράσης έναντι του
οξειδωτικού stress με την μέθοδο In Cell Western ΙCW
Στα πειράματα μελέτης του κυτταρικού πολλαπλασιασμού και κυτταροτοξικότητας με χρήση ΜΤΤ
σε
in vitro
σύστημα σε κύτταρα HepG2, δοκιμάστηκαν συγκεντρώσεις από 0.005 mg/ml έως 5 mg/ml.
Όπως προέκυψε από τα αποτελέσματα κανένα από τα εκχυλίσματα δεν εμφάνισε κυτταροτοξική δράση
σε καμιά από τις εξεταζόμενες δόσεις (Σχήμα 1). Παρόμοια αποτελέσματα ;προέκυψαν και από τα
πειράματα που διενεργήθηκαν σε κύτταρα Hela.
Ο έλεγχος με ANOVA (SPSS) δεν έδειξε στατιστικά σημαντικές διαφορές μεταξύ του δείγματος
ελέγχου και των υπό εξέταση εκχυλισμάτων (p>0.05
).
Τα πειράματα μελέτης των γονοτοξικών ιδιοτήτων των εν λόγω υδατικών εκχυλισμάτων με τη
μέθοδο του comet assay προέκυψε ότι τα εξεταζόμενα δείγματα δεν προκαλούν αλλοιώσεις στο γενετικό
υλικό στις συγκεκριμένες πειραματικές συνθήκες. Τα αποτελέσματα συνοψίζονται στο Σχήμα 2.
Σχήμα 1.
Αποτελέσματα πειραμάτων κυτταροτο-
ξικότητας με τη μέθοδο ΜΤΤ σε κύτταρα HepG2
μετά από επώαση με υδατικά εκχυλίσματα
τμημάτων του φυτού
Opuntia ficus
. Οι τιμές είναι
ο μέσος όρος από 4 ανεξάρτητα πειράματα.
Σχήμα 2.
Αποτελέσματα πειραμάτων μελέτης
επαγωγής γονοτοξικότητας με τη μέθοδο comet
σε κύτταρα HepG2 μετά από επώαση με υδατικά
εκχυλίσματα
Opuntia ficus
(OF1, ΟF2, OF3,
OF4, OF5). (*: p< 0.05; **: p<0.01; ***:p<0.001,
*:vsH2O, #: vs H2O2) Οι τιμές είναι ο μέσος όρος
από 4 ανεξάρτητα πειράματα, n=4
Στα πειράματα μελέτης πιθανής
προστατευτικής δράσης των εξεταζόμενων εκχυλισμάτων, κύτταρα HepG2 εκτίθενται σε παράγοντες
που είναι γνωστό ότι προκαλούν αλλοιώσεις στο γενετικό υλικό (π.χ. Η
2
Ο
2
) παρουσία ή απουσία των
εξεταζόμενων εκχυλισμάτων, προκειμένου να διαπιστωθεί εάν η ύπαρξη των εκχυλισμάτων αυτών
δρα προστατευτικά σε κυτταρικό επίπεδο, μειώνοντας την οξειδωτική δρ’αση του Η
2
Ο
2
. Όπως φαίνεται
στο παρακάτω Σχήμα 3 τα κύτταρα που είχαν επωαστεί απουσία εκχυλίσματος με Η
2
Ο
2
παρουσιάζουν αλλοιώσεις του DNA τους και το ποσοστό DNA στην ουρά του κομήτη (αλλοιωμένο
Συγκέντρωση
Απορρόφηση στα 590 nm (% του
δείγματος ελέγχου
Επώαση με
% DNA στην «ουρά» του «κομήτη»
