87
συστήματα τους, όπως το καρδιαγγειακό και το κεντρικό νευρικό σύστημα δίνουν ανάλογη
ανταπόκριση με εκείνο του ανθρώπου.
Τα
zebrafish χρησιμοποιούνται για την
in vivo
μελέτη της
τοξικότητας καθώς και των αναπτυξιακών μονοπατιών που εμπλέκονται σε αυτή. Στο πλαίσιο της
υποχρέωσης του Εργαστηρίου Τοξικολογικού Ελέγχου να προσαρμοστεί στις νέες επιταγές της
Ευρωπαϊκής νομοθεσίας ανέπτυξε και λειτούργησε πλήρη εγκατάσταση εκτροφής και αναπαραγωγής
ιχθυδίων zebrafish (
Danio rerio
) και
φιλοξενεί έως 100 ενήλικα ψάρια.
Το έμβρυο του ψαριού zebra
είναι ένα εναλλακτικό μοντέλο ζώου που αντιπροσωπεύει την πολυπλοκότητα φυσιολογικών και
μορφολογικών αλληλεπιδράσεων
in vivo
σε έναν ολόκληρο οργανισμό. Ως εκ τούτου, η πιθανή
τοξικότητα μπορεί να εκτιμηθεί στο πλαίσιο ενός πλήρους οργανισμού, παρέχοντας πολύ
περισσότερες και πιο πολύπλοκες πληροφορίες από άλλα εναλλακτικά μοντέλα που βασίζονται σε
μεμονωμένα κύτταρα. Επιπλέον, το μέγεθος και η διαφάνειά του καθιστά το zebrafish κατάλληλο
μοντέλο για πειραματικούς χειρισμούς και οπτική παρακολούθηση σε πραγματικό χρόνο.
Στο νέο πειραματικό μοντέλο zebrafish μελετήθηκε η δράση του μυκητοκτόνου Triadimefon
(FON) προκειμένου να ανιχνευτεί η πιθανή αναλογία στην πρόκληση βλαβών στο συγκεκριμένο
πειραματικό μοντέλο με τις βλάβες που προκαλούνται από το FON στα θηλαστικά. Το FON
χρησιμοποιείται για την προστασία των καλλιεργειών και ανιχνεύεται ευρέως στο περιβάλλον. Οι
αναπτυξιακές επιδράσεις αυτής της τριαζόλης έχουν μελετηθεί σε διάφορα
in vivo
και
in vitro
μοντέλα.
Μελέτες που διεξήχθησαν σε τρωκτικά, τα οποία εκτέθηκαν σε υψηλά και μεσαία επίπεδα FON
1
απέδειξαν την αρνητική επίδραση της ουσίας στη φυσιολογική ανάπτυξη του εμβρύου
2
. Οι δυσπλασίες
που παρατηρήθηκαν μετά τη χορήγηση FON αφορούσαν στις κρανιοπροσωπικές δομές, όπως
δημιουργία λυκοστόματος, μη φυσιολογική ανάπτυξη του αξονικού σκελετού
3
και των άκρων
4
και σε
ορισμένες περιπτώσεις καρδιακές ανωμαλίες. Επίσης, αποτελέσματα σε
ιn vitro
καλλιέργειες
ολόκληρων εμβρύων επίμυων μετά από έκθεση του FON, αναφέρουν ένα παρόμοιο πρότυπο
ανωμαλιών, κυρίως στο επίπεδο των βραγχιακών τόξων.
Ωστόσο, μέχρι σήμερα, δεν έχουν πραγματοποιηθεί αξιόπιστες και εμπεριστατωμένες μελέτες, οι
οποίες να περιγράφουν με λεπτομέρεια τις ανωμαλίες που προκαλούνται στους υδρόβιους οργανισμούς
μετά από έκθεση αυτών στην ουσία FON. Ο σκοπός της παρούσας εργασίας ήταν η λεπτομερής
περιγραφή, αναγνώριση και αξιολόγηση πιθανών αναπτυξιακών ανωμαλιών που προκαλούνται από την
έκθεση FON, καθώς και η διερεύνηση του κατά πόσο τα ευρήματα στα zebrafish συνάδουν με τα
φαινοτυπικά ευρήματα στα θηλαστικά, όπως αυτά έχουν περιγραφεί από παλαιότερες μελέτες. Τα
αποτελέσματα των πειραμάτων έδειξαν ότι η έκθεση των εμβρύων zebrafish σε 4 µg/ml FON για 120 ώρες
μετά τη γονιμοποίηση προκάλεσε σημαντικές παραμορφώσεις σε διάφορα συστήματα.
1
Menegola E, Broccia ML, Di Renzo F, Massa V, Giavini E. Study on the common teratogenic pathway elicited by the
fungicides triazole-derivatives. Toxicol In Vitro. 2005;19(6):737-48.
Menegola E, Di Renzo F, Broccia ML. Cleft palate and exposure to an azole derivative: Triadimefon. Reprod Toxicology.
2009;28:123.
2
Menegola E, Broccia ML, Di Renzo F, Massa V, Giavini E. Study on the common teratogenic pathway elicited by the
fungicides triazole-derivatives. Toxicol In Vitro. 2005;19(6):737-48.
Menegola E, Di Renzo F, Broccia ML. Cleft palate and exposure to an azole derivative: Triadimefon. Reprod Toxicology.
2009;28:123.
Wolf DC, Allen JW, George MH, Hester SD, Sun G, Moore T, et al. Toxicity profiles in rats treated with tumorigenic and
nontumorigenic triazole conazole fungicides: Propiconazole, triadimefon, and myclobutanil. Toxicol Pathol. 2006;34(7):895-
902.
Menegola E, Broccia ML, Di Renzo F, Giavini E. Postulated pathogenic pathway in triazole fungicide induced dysmorphogenic
effects. Reprod Toxicol. 2006;22(2):186-95.
Menegola E, Broccia ML, Di Renzo F, Giavini E. Antifungal triazoles induce malformations in vitro. Reprod Toxicol.
2001;15(4):421-7.
Hester SD, Wolf DC, Nesnow S, Thai SF. Transcriptional profiles in liver from rats treated with tumorigenic and non-
tumorigenic triazole conazole fungicides: Propiconazole, triadimefon, and myclobutanil. Toxicol Pathol. 2006;34(7):879-94.
3
Menegola E, Broccia ML, Di Renzo F, Massa V, Giavini E. Craniofacial and axial skeletal defects induced by the fungicide
triadimefon in the mouse. Birth Defects Res B Dev Reprod Toxicol. 2005;74(2):185-95.
Di Renzo F, Broccia ML, Giavini E, Menegola E. Antifungal triazole derivative triadimefon induces ectopic maxillary cartilage
by altering the morphogenesis of the first branchial arch. Birth Defects Res B Dev Reprod Toxicol. 2006;80(1):2-11.
Di Renzo F, Broccia ML, Giavini E, Menegola E. Stage-dependent abnormalities induced by the fungicide triadimefon in the
mouse. Reprod Toxicol. 2011;31(2):194-9.
4
Menegola E, Broccia ML, Di Renzo F, Massa V, Giavini E. Craniofacial and axial skeletal defects induced by the fungicide
triadimefon in the mouse. Birth Defects Res B Dev Reprod Toxicol. 2005;74(2):185-95.
