79
DNA) ξεπερνά σε ποσοστό το 80%. Αντίθετα τα κύτταρα που είχαν αρχικά επωατεί με τα υδατικά
εκχύλισμα πριν την έκθεση σε Η
2
Ο
2
δεν εμφανίζουν ανάλογες αλλοιώσεις.Η παρατήρηση αυτή είναι
ενδεικτική της κυτταροπροστευτικής δράσης σε επίπεδο DNA των των συγκεκριμένων εκχυλισμάτων
έναντι του οξειδωτικού στρες που προκελείται από την έκθεση των κυττάρων σε Η
2
Ο
2
.
Σχήμα 3.
Αποτελέσματα μελέτης πιθανής
προστατευτικής
δράσης
των
υδατικών
εκχυλίσματων
Opuntia ficus
(OF1, ΟF2, OF3,
OF4, OF5) έναντι του οξειδωτικού stress ή/και
της γονοτοξικότητας με τη μέθοδο comet assay
σε κύτταρα HepG2. (*: p< 0.05; **: p<0.01;
***:p<0.001, *:vsH2O, #: vs H2O2) Οι τιμές είναι
ο μέσος όρος από 4 ανεξάρτητα πειράματα,n=4
Τέλος με τη χρήση της μεθόδου προσδιορισμού κυτταροτοξικότητας, γονοτοξικότητας και
προστατευτικής δράσης γH2AX In Cell Western (ICW), η οποία αποτελεί μια νέα και αυξημένης
ευαισθησίας μέθοδο σε σχέση με τις προαναφερθήσες μεθόδους, επιβεβαιώθηκαν τα ανωτέρω
αποτελέσματα που που προέκυψαν από τη μελέτη με τις κλασικές μεθόδους.
Τ
ΜΗΜΑ
Ελέγχου Γεωργικών Φαρμάκων και Φυτοφαρμακευτικής
Ε
ΡΓΑΣΤΗΡΙΟ
Τοξικολογικού Ελέγχου Γεωργικών Φαρμάκων
Υ
ΠΕΥΘΥΝΕΣ
Ε
ΡΓΟΥ
Δρ Κ. Κυριακοπούλου, Δρ Κ. Μαχαίρα
Ε
ΜΠΛΕΚΟΜΕΝΟ
Π
ΡΟΣΩΠΙΚΟ
Δρ Ε. Κατσάνου, Η. Ραπτάκη
Δ
ΙΑΡΚΕΙΑ
Ε
ΡΓΟΥ
1.9.2014 – 31.12.2015
Κ
ΑΛΥΨΗ
Δ
ΑΠΑΝΗΣ
100% ΜΦΙ
4.4.4
In vitro
τοξικολογικός έλεγχος βιοδραστικών ενώσεων και εκχυλισμάτων της
Μαστίχας Χίου
Σε συνέχεια μελέτης που δημοσιεύθηκε από Doi
et al
.,2009
1
σχετικά με τις ανεπιθύμητες
επιδράσεις της Μαστίχας Χίου στο ήπαρ, επισημάνθηκε η ανάγκη από την Ένωση
Μαστιχοπαραγωγών Χίου για περαιτέρω μελέτη των πιθανών ανεπιθύμητων επιδράσεων του
προιόντος με σκοπό την υποστήριξη του προιόντος. Για το σκοπό αυτό διενεργήθηκαν αρχικά
ορισμένα πειράματα
in vivo
τα οποία υποστήριξαν την ασφαλή χρήση της μαστίχας σε δόσεις
ανάλογες με αυτές που λαμβάνονται από τον άνθρωπο (Katsanou
et al
., 2014
2
) Στη συνέχεια για να
υποστηριχθούν τα ανωτέρω αποτελέσματα διενεργήθηκαν πειράματα σε
in vitro
συνθήκες με τη χρήση
της Μαστίχας Χίου και βιοδραστικών ενώσεων της καθώς και εκχυλισμάτων της , στην κυτταρική σειρά
ηπατοκαρκινώματος ανθρώπου HepG2..Οι ενώσεις που μελετήθηκαν ήταν δύο καθαρές ισομερείς ουσίες
(μαστιχαδιενονικό οξύ και ισομαστιχαδιενονικό οξύ), το ολικό εκχύλισμα μαστίχας, από το οποίο είχε
αφαιρεθεί το πολυμερές (ΟΕΧΠ), η ολική ακατέργαστη μαστίχα (ΟΑΜ), καθώς και το όξινο και ουδέτερο
κλάσμα της μαστίχας. Οι έλεγχοι που πραγματοποιήθηκαν είναι οι εξής:
-
μελέτη κυτταρικού πολλαπλασιασμού και κυτταροτοξικότητας με τη χρήση χρωμογόνου MTT,
-
μελέτη της απόπτωσης με τη μέθοδο «Ιn Cell Western - apoptosis assay»,
-
μελέτη επαγωγής οξειδωτικού stress και γονοτοξικότητας με τη μέθοδο COMET assay
1
Doi K., Wei M., Kitano M., Uematsu N., Inoue M., Wanibuchi H. Enhancement of preneoplastic lesion yield by Chios mastic
gum in a rat liver medium-term carcinogenesis bioassay. Toxicology and Applied Pharmacology, 2009, 234(1), 135-142.
2
Katsanou E., Kyriakopoulou K., Emmanouil C., Skaltsounis A.L. and Machera K. 2014. Modulation of CYP1A1 and CYP1A2
Hepatic Enzymes after Oral Administration of Chios Mastic Gum to Male Wistar Rats. PLOS One 9(6) : e100190.
doi:10.1371/journal.pone.0100190)e100190
Επώαση με
% DNA στην «ουρά» του «κομήτη»