Page 123 - 2009

Α. Ερευνα - Εφαρμογές - Παρατηρήσεις 122
(Xριστίνα Εμμανουήλ, Κ.Μ. Κασιώτης και Κυριακή Μαχαίρα)
21.Σταθερότητα λυσοσωμικής μεμβράνης κυττάρων αιμολέμφου του μυδιού
Mytilus galloprovinciallis (Neutral Red assay).
Η σταθερότητα της λυσοσωμικής μεμβράνης είναι ένας ευρέως χρησιμοποιούμενος
βιοδείκτης που δίνει μια ένδειξη του γενικευμένου στρες στον οργανισμό (κυτταροτοξι-
κότητα). Σε φυσιολογικά δείγματα τα λυσοσώματα διατηρούν στο εσωτερικό τους την
ουδέτερη κόκκινη χρωστική (NR) για σχετικά μεγάλη χρονική περίοδο. Η αποσταθερο-
ποίησή τους σε κατάσταση στρες προκαλεί συγχώνευση των λυσοσωμάτων και διαμόρ-
φωση μεγαλύτερων δομών και στη συνέχεια διαρροή των χρωστικών ουσιών από το
λυσόσωμα στο κυτταρόπλασμα.
Μύδια Mytilus galloprovinciallis από μη ρυπασμένη περιοχή της Εύβοιας (Λιχάδα)
μεταφέρθηκαν στο ΜΦΙ και μετά από εγκλιματισμό 12 ωρών περίπου ένας αριθμός θα-
νατώθηκε. Αιμολέμφος αποσπάστηκε από τον προσαγωγό μυ του οργανισμού μέσω
σύριγγας και απλώθηκε στην επιφάνεια μιας αντικειμενοφόρου πλάκας. Στη συνέχεια
προστέθηκαν 40 μl NR working solution (αραίωση 1:250 του NR stock solution σε διάλυ-
μα 4-(2-hydroxyethyl)-1-piperazineethanesulfonic acid (HEPES)-αλάτων). Οι αντικειμενο-
Εικόνα 1. Α: βλάβες DNA σε βράγχια από ομάδα ελέγχου, Β: βλάβες DNA σε βράγχια από ομάδα
10 mg/L Thiram, Γ: βλάβες DNA μετά από επώαση με Fpg σε βράγχια από ομάδα 1 mg/L Thiram, Δ:
αποπτωτικό κύτταρο θετικού μάρτυρα.
Α
Δ
Β
Γ